精浆锌定量检测试剂盒(改良PAR法)说明书

【产品名称】

通用名称:精浆锌定量检测试剂盒(改良 PAR 法)

英文名称:Seminal Plasma Zinc Quantitative Assay Kit (modified 5-Br-PAPS)

【包装规格】 20 人份/盒

【预期用途】用于定量检测人精浆中锌含量。

【检验原理】精浆锌和吡啶偶氮间苯二酚在屏蔽剂的作用下,于 pH9.5 的反应体系中,生成特异性的锌-色原复合物,在 470nm 波长处有最大吸收峰,其吸光度大小与精浆锌含量成正比。

【主要组成成分】
1.屏蔽剂 15ml×1 瓶 含柠檬酸钠 0.1g/ml
2.锌校准液 1ml×1 瓶 含锌 1.5mmol/L
3.显色液 3ml×1 瓶 含 PAR 0.2mg/ml
 4.去离子酶标微孔板  8 孔/条×12 条
5.酶标板架 96 孔/个×1 个

( 不同批号试剂盒中各溶液试剂不可以互换)

【储存条件及有效期】 2-8℃保存有效期一年。

【适用仪器】 酶标仪 配备 490nm 或 492nm 滤光片

【样本要求】

1.受试者精液标本采集前应禁欲 3-7 天,标本采集过程中,射精应彻底,标本收集应完整,不得遗漏。实验室须准确记录一次排精总量(ml)。

  1. 本方法十分灵敏,所有盛装精液标本及检测用容器、吸咀必须先进行去离子化预处理,以确保精浆从

标本留取到检测全过程无外源性锌离子污染。

【检验方法】

一、试剂准备

  1. 3000g 离心精液标本 10 分钟,取出精浆,于-20℃及以下储存待分析。
  2. 精浆、校准液各 40ul 于微孔板内,然后分别加屏蔽剂 200ul 稀释,充分混匀。
  • 操作方法

空白管                        校准管                     检测管

屏蔽剂(ul) 10
稀释校准液(ul) 10
稀释精浆(ul) 10
屏蔽剂(ul) 200 200 200
振荡混匀
显色剂(ul) 50 50 50

振荡混匀,室温放置 5min,空白管调零,酶标仪 490nm 或 492nm 比色

 

结果计算

  1. 为简化操作,可在酶标仪上建立计算程序。仪器所判读结果即为已计算标本稀释系数的精浆锌实际浓度(mmol/L)。不同酶标仪程序参数各不相同。以下仅以 Bio-Tek ELx800 酶标仪为例

Bio-Tek ELx800 酶标仪程序设置(仪器自动减空白对照及直接计算检测标本浓度)主要参数如下:

MAPPING DIRECTION: DOWN;

BLANK MAP: FULL;

ENTER NUMBER OF STANDARDS:01

ENTER NUMBER OF STANDARD REPLICATES: 01

CONCN. OF STD1: 1.5

进入 FORMULA 菜单,按 MORE,选择 TRANS-VAR,在 TRANS-VAR 子菜单中完成如下操作:

选择OD 后按 ENTER,在 MAP 中选择 STD1;X。按“Previous Screen”一次退出,进入TRANS菜单。在 TRANS 菜单中,按 MATH、OTHER、MAP 等键,输入公式:(OD/TVAR)*1.5 ,退回主菜单即可。

手工计算则按下式进行:锌浓度(mmol/l)=1.5×(标本 OD-空白 OD)/(标准OD-空白 OD))

  1. 锌最终检测结果以“μmol/一次射精”方式报告,因此需要在酶标仪检测结果基础上,再分别乘以受试者此次的排精总量(ml),即:一次射精锌总量(μmol)= 锌浓度(mmol/l)×一次射精精液总量(ml)

【阳性判断值或者参考区间】 ≥2.4μmol/一次射精(WHO);

暂定中国人正常参考值:≥10μmol/一次射精 (临床检测统计)

【检验结果的解释】

检测精浆必须充分离心(3000g,10min),高蛋白精浆使检测结果略有偏高。

【检验方法的局限性】

本试剂盒方法对盛装精液的容器、酶标微孔板、一次性吸咀等洁净度要求高,须经去离子化处理。

【产品性能指标】

  1. 试剂盒批内变异系数CV%≤10%
  2. 试剂盒批间相对偏差R≤15%
  3. 参考物质测试值相对偏差R不超过±15%
  4. 干扰试验干扰率不超过±10%

【注意事项】

  1. 本方法理论上虽可用分光光度计进行比色分析,但比色皿必须先进行去离子化处理,且由于本反应瞬间即可完成,因此比色皿只能在去离子后使用一次。为保证检测结果的准确性及便于操作,建议以微孔板上酶标仪比色
  2. 本试剂盒所提供的酶标微孔板、一次性吸咀已经去离子化处理,请妥善保存以免污染。
  3. 精浆锌定量检测试剂盒为体外诊断试剂盒,检测结果仅供临床参考,对患者的临床诊断应结合患者病

史、体征及其他实验室检查结果等情况综合考虑。

【标识的解释】无

【参考文献】

  1. 张秀成,《精子检测与分离》,北京科学技术出版社,1993,73-78
  2. Johnson,Ø. & Eliasson,R.(1987)Evaluation of a commercially available kit for colorimetric determination of zinc in human seminal plasma.International Journal of Andrology,10:435—40.

【基本信息】

注册人/生产企业名称:深圳华康生物医学工程有限公司

住   所:深圳市大鹏新区葵涌街道银葵路16号君轩科技园D栋

联系方式:电话:0755-89252658 0755-33853878        传真:0755-84208855 0755-33853879

售后服务单位名称:深圳华康生物医学工程有限公司

联系方式:电话:0755-89252658 0755-33853878        传真:0755-84208855 0755-33853879

生产地址:深圳市大鹏新区葵涌办事处葵新社区银葵路16号君轩公司D栋厂房一层、二层、三层

生产许可证编号:粤食药监械生产许20030802号

【医疗器械注册证书编号/产品技术要求编号】粤械注准 20152400613

【说明书核准日期】2015 年 7 月 6 日

【说明书修改日期】2016 年 6 月 12 日