EB病毒VCA抗体(IgA)检测试剂盒(酶联免疫法)说明书

【产品名称】

通用名称:EB病毒VCA抗体(IgA)检测试剂盒(酶联免疫法)

【包装规格】96人份/盒

【预期用途】

本试剂盒采用ELISA间接法定性检测人血清或血浆样品中的EB病毒VCA IgA抗体,用于EB病毒感染的

辅助诊断。

【检验原理】

本试剂盒采用基因工程表达的EB病毒VCA抗原作为包被抗原包被微量反应板,加入待检标本,再加入酶标记抗人IgA(抗人-IgA-HRP)。当待检标本中存在EB病毒VCA抗体(IgA)时,就会与包被的EB病VCA抗原和抗人-IgA-HRP结合形成复合物。通过酶标仪检测O.D值,判定样品中EB病毒VCA IgA抗体的存在与否。

【主要组成成分】

名 称 主要成分 96人份/盒
包被板 EBV VCA抗原,工作效价大于1:2000 12孔×8条
阳性对照 EB病毒VCA IgA 抗体阳性血清,0.5g/L氨基比林,磷酸盐缓冲液 0.5ml×1瓶
正常对照 EB病毒VCA IgA 抗体阴性血清,0.5g/L氨基比林,磷酸盐缓冲液 0.5ml×1瓶
样品稀释液 6.4g/L酪蛋白,磷酸盐缓冲液 11 ml×1瓶
酶结合物 抗人-IgA-HRP,工作效价大于1:2000,磷酸盐缓冲液 11 ml×1瓶
浓缩洗涤液 20×,吐温-20磷酸盐缓冲液 20 ml×1瓶
显色剂A 0.4g/L过氧化脲 6.8ml×1瓶
显色剂B 0.5g/L TMB·2HCl 6.8ml×1瓶
终止液 2MH2SO4 6.8 ml×1瓶

【储存条件及有效期】

  1. 2~8℃避光保存,有效期自检测合格之日起12个月。
  2. 包被板开封后2~8℃避光保存,使用期限为15天。

【适用仪器】加样器、温箱、洗板机、含波长450nm的酶标仪。

【样本要求】

  1. 本试剂适用检测人血清或血浆;
  2. 为取得最佳试验效果,必须使用新鲜的血清或血浆样品(干净,无溶血、浑浊);
  3. 可能需要重复进行试验,推荐最少取样量为50 ul;
  4. 短期(2天)将进行检测的血清样品可存放于2~8℃,如需长期保存,应置于-20℃或以下,试验前需完全混匀。不要使用无霜冷冻,因为该方法必须要有解冻过程,会导致抗体活性减低。避免反复

冻融。

【检验方法】

  1. 洗涤液配制:用蒸馏水或纯化水将浓缩洗涤液按1:20稀释。
  2. 加样:设空白对照、正常对照及阳性对照各两孔。正常对照和阳性对照各加100μl,其他孔分别加入样品稀释液100ul/ 孔,待测孔再各加入5ul待测样品(在孔内用加样器充分混匀),微量振荡器上振荡20秒。
  3. 温育:置37℃避光反应30分钟。
  4. 洗板:① 手工洗板:甩去孔内液体,扣干,用洗涤液注满各孔,静置1分钟,共三次,每 次洗后

均需扣干。② 洗板机洗板:选择洗涤5次洗板程序洗板,洗板后扣干。

  1. 加酶:除空白对照孔外,每孔加酶结合物100μl。
  2. 温育:振荡均匀,置37℃避光反应20分钟。按步骤4洗板并扣干。
  3. 显色:每孔加显色剂A、B各50μl,振荡混匀,置37℃温育10分钟。
  4. 测定:每孔加终止液50μl ,振荡混匀后在450nm波长读数。

【阳性判断值或者参考区间】

  1. Cut-off 值(COV)=0.270+正常对照平均OD值(正常对照平均OD值<05时按0.05计)。
  2. 有效性判定:空白对照孔OD值<150(否则试验无效,必须重做);正常对照孔OD值≤0.200(否则试验无效,必须重做);

【检验结果的解释】

  1. 判定试验结果前,所有对照及标本孔的OD值均要减去空白对照的OD值。
  2. 样本OD值COV值时,判为EBV VCA IgA抗体阳性,

样本OD值<COV值时,判为EBV VCA IgA抗体阴性。

  1. EB病毒VCA IgA抗体阳性是EB病毒既往感染的指标之一, EB病毒VCA IgA抗体阳性需定期随访观察,必要时进行相关疾病的具体检查。

【检验方法的局限性】

  1. 本试剂盒仅作为定性筛选试剂用;
  2. 本试剂盒仅用于人血清或血浆样本的检测;
  3. 本品检测阳性,只提示EB病毒感染,人体对EBV的VCA抗原产生IgA抗体,并不能确定是初次感染、

既往感染或重新近感染,亦不能诊断鼻咽癌,需要结合其他临床资料进行分析。

  1. 本品检测阴性,不能排除EB病毒感染。

【产品性能指标】 EB 病毒VCA抗体(IgA)检测试剂盒参考品。

项目内容 标准规定 检验结果
阴性参考品15份 阴性参考品符合率为15/15 符合规定
阳性参考品15份 阳性参考品符合率为15/15 符合规定
灵敏度系列稀释参考品 1:21、1:42为阳性,1:84可阳性或阴性,1:168为阴性 符合规定
精密性参考品1份 平行测定10孔,精密性≤15% 符合规定

【注意事项】

  1. 本试剂盒仅供体外诊断用。
  2. 试剂不得进入口腔。避免接触眼睛、皮肤和粘膜组织。严格按照使用说明书进行操作,操作时穿防护衣和手套。在试验操作时禁止吸烟和饮食。
  3. 避免样品稀释液、底物液终止液等与皮肤和粘膜组织相接触。一旦接触,立即用清水彻底洗涤。
  4. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时,应在室温中平衡至潮气尽干后方可开封启用,未使用完板条即时放回有干燥剂的袋中,密封保存。所有试剂使用后立即放回2~8℃冰箱保存。
  5. 滴加试剂前应将瓶轻摇,使液体混匀,首滴弃之,滴加时瓶身应保持垂直,以使滴量准确。
  6. 瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组分不可混用。
  7. 孵育时建议使用水浴箱。如无水浴箱,可使用密封湿盒放入37℃温箱。试验过程中避免微孔蒸干,

洗板后立即加入试剂。

  1. 叠氮化钠会抑制酶结合物的活性,因此一定要用干净的移液管转移酶结合物,以免携带来自其他试剂的叠氮化钠。
  2. 如果试验使用次氯酸钠作为消毒剂,请不要将之置于试验区域,以免干扰酶活性。

10.同一样本的抗VCA IgA抗体的浓度使用不同厂家试剂分析,测得值会不同。因为试验方法和试剂专

一性可能不同。

11.试剂盒及样本都应视为传染源来处理。

【生产日期】见试剂盒侧面

【失效日期】见试剂盒侧面

【标识的解释】无

【参考文献】

  1. 中国生物制品主要原辅材料质控标准(2000版)……中国生物制品标准化委员会
  2. 临床酶免疫测定技术(2005版、人民军医出版社)……李金明

【基本信息】

注册人/生产企业名称:深圳华康生物医学工程有限公司

住   所:深圳市大鹏新区葵涌街道银葵路16号君轩科技园D栋

联系方式:电话:0755-89252658 33853878         传真:0755-84208855 33853879

售后服务单位名称:深圳华康生物医学工程有限公司

联系方式:电话:0755-89252658 33853878         传真:0755-84208855 33853879

生产地址:深圳市大鹏新区葵涌办事处葵新社区银葵路16号君轩公司D栋厂房一层、二层、三层

生产许可证编号:粤食药监械生产许20030802号

【医疗器械注册证书编号/产品技术要求编号】国械注准20163400260

【说明书核准日期】2016年2月4日

【说明书修改日期】2016年6月15日